财经频道

主页 > 财经 > 国际新闻 > 国际技术 > 美国SGI冷冻精液解冻程序

美国SGI冷冻精液解冻程序

作者:佚名来源:猪e网编译时间:2015-09-21 13:49点击:


  需要或推荐的设备:

  Modena粉(从SGI采购)、蒸馏水(可以从选定的商店或百货店购买)、刻度塑料输精瓶(容量至少应为80ml)、用于混合稀释液的无菌玻璃或塑料容器(1-2L容量)、用于将稀释液倒入瓶中的玻璃或塑料烧杯,或直接从SGI购买现成的稀释液,解冻设备或用于解冻精液管的水槽,计时器、用于将精液管从液氮罐中取出的钳子或大镊子,纸巾,剪刀、摄氏或华氏温度计。

  程序:

  1、准备冻精稀释剂

     将整包MODENA 粉末倒入1000ml(1升)或2000ml(2升)洁净无菌的瓶中或容器中,加入1000ml蒸馏水(不是去离子的或活性炭过滤的)至瓶中,振荡摇匀。将稀释液在室温放置15~30分钟使其稳定,分装到12个有刻度的塑料输精瓶中,每瓶约80ml,并在瓶子上标明过期时间,存于-20℃冰箱中。不要使用其它公司的冻精或鲜精稀释剂,因为他们是针对自己的冻精方法而开发的产品。稀释液在使用前应放置在-20℃冰箱中,其有效期为6个月(包括当天)。

  用热水(请不要使用肥皂)将稀释液的瓶子漂洗几次,然后用蒸馏水漂洗6次,将瓶子或容器装满蒸馏水并放在一个足够深的盆中以便注满热水至瓶或容器的颈部,煮沸10分钟进行灭菌,将容器风干并盖紧保存以待下次使用。

  2、调节稀释液至20℃(68℉)

  将稀释液瓶子放在冷水槽或冰箱(如果太热)几分钟、或热水槽(如果太冷)。将所需数量的冷冻稀释液在室温下放置过夜更方便,会比需要时解冻冷冻的稀释液瓶更接近理想的温度20℃(68℉),可上下浮动1℃。

  3、50℃(122℉)水浴

  如果有冻精管的解冻设备或是电子水浴锅,应确保调节至50℃并在使用前用温度计进行检查。在水槽中充满热水并调节至50℃(122℉),可上下浮动1℃。

  4、解冻冻精管

  将液氮罐靠近解冻水槽或解冻设备,这会减少冷冻精管从液氮罐转移到水槽期间处于室温的时间。将提桶提升到液氮罐颈部上方并快速取出一管(1头份)冻精,提桶离开液氮环境不得超过几秒,特别是在有其它冻精管在提桶时。冻精管离开液氮环境暴露于室温环境超过5秒将导致精液质量下降。在快速将冻精管从液氮罐取出的同时检查公猪的名字,快速将冻精管放入50℃水浴锅,冻精管水浴45秒,解冻时无需拿住冻精管。如果需要解冻1管以上,请确保水浴温度始终维持在50℃。

  5、冻精质量分析

    如果要分析冻精质量,有几点要谨记。首先应确保样本在分析前至少加温30分钟。这可以用微波炉对一个凝胶块进行加热来做到,加热至手腕内侧可以忍受的程度。将稀释的样本放在凝胶块的上方,并置于小样本管、小密封容器或带拉链的塑料袋中。使用普通的载玻片和咖啡因包被的载玻片分析样本(SGI有售),加热时间和咖啡因的环境对于温育并唤醒细胞是必需的,这样能准确估计细胞在生殖道的潜能。如果分析没有加热且没有咖啡因包被的样本,细胞会很少移动且看上去很脆弱,这表明样本加热时间不足,未能适应新的环境。

  6、转移到配种舍

  把解冻的精液带到配种舍准备输精时,将精液放在隔热保温的容器或区域中(20-27℃或68-80℉),为了达到最大的受胎率,建议将解冻的精液在解冻后尽快进行输精。因为解冻后的精子活力会随着时间下降,解冻后超过一小时精液即不能再使用。

责任编辑:王妍琪  

热门讨论

产品直通车

百度推广