猪支原体肺炎免疫防控新方法，你知道吗？（三）

　　——记“首届猪支原体肺炎防控国际论坛”

　　9月8日上午8:30，“首届猪支原体肺炎防控国际论坛”最后阶段的议程正式开始，在经历了昨天各路专家针对猪支原体肺炎专业解读和为我们的答疑解惑以后，在最后一天的议程中，这些国际大咖又会为大家带来哪些“干货”呢？——一起来看！

　　江苏省农科院刘茂军博士作为主持人，主持了本届论坛的最后阶段议程。

　　Steven Djordjevic——猪肺炎支原体侵入上皮细胞的机制研究

　　Steven Djordjevic首先强调，中国养猪业异常庞大，生猪出栏量也是与日俱增。在数量飞速增长的当下，我们必须注重食品安全，而猪肉食品安全的问题是我们亟待解决的。

　　抗生素使用问题严峻

　　Steven Djordjevic通过实例研究表明：中国式世界最大的抗生素使用量，其次为美国、巴西等。因此，我们不能始终依赖抗生素，而是要利用一些其他办法来解决问题。包括猪的排泄物当中，即使将它们释放以后，他们内含的抗生素依然会存在，还会带来耐药的问题，所以我们需要将这些污水和排泄物进行处理。史蒂文通过动物机体的耐药性直接引入主题——猪支原体肺炎的病原侵入上皮细胞的研究机制。

　　作用机制

　　Steven Djordjevic指出：猪肺炎支原体主要影响部位在动物的呼吸道纤毛，在其作用下，可以导致纤毛摆动停滞、内皮细胞死亡、黏膜纤毛活动梯损伤等各类问题，并且一次感染可以继续为后期病原的感染提供适宜的环境。猪肺炎支原体可以利用寄生的形式选择式进华造成基因组衰减的结果。因此，它在呼吸道内作用机理也是十分复杂的，其可以通过翻译、复制等程序不断的增殖。除此以外，支原体还可以在蛋白上粘附以后进一步感染其他细胞，这是我们需要重视的问题。

　　支原体病原很有可能是主动分泌到细胞表面的！

　　从新的受体到细胞表面机动蛋白，任何形式、种类的支原体都可以粘附到细胞表面，但到底是主动还是被动粘附，这需要我们去考证，但Dr. Steven Djordjevic个人认为不会是被动粘附的，因为他已经通过了实验在这些复杂机制作用下让肺炎支原体得到初步融合，也初步验证了他的结论。

　　Frey Joachim——分子流行病学监测手段：一项净化猪气喘病的关键技术

　　猪肺炎支原体区分需要多种方式检测

　　Frey Joachim利用在猪肺炎支原体研究领域很受关注的絮状支原体提出自己的观点：絮状支原体是一种猪体内无病害共生菌。通过对絮状支原体与肺炎支原体的对比观察我们可以发现：二者基因十分相近，仅仅是在少量基因方面有所区分，这就要求我们在检测过程中对这两种支原体加以区分，避免误诊的出现。

　　另外，Frey Joachim强调：即使是肺炎支原体，它的DNA也会随着时间的推移和环境的变化发生一些变异，这会致使某些样本发生基因缺失，但是这部分缺失不会对其致病力造成影响，所以我们要对各种肺炎支原体进行多种方式的检测，综合得出一个可信度较高的结论。

　　治疗用抗越少越好，因为耐药性问题很严重！

　　在免疫方面，Frey Joachim的结论和之前几位专家基本一致——疫苗免疫虽然可以控制猪支原体肺炎的发病率，但是没有根治或者去除内部感染，在这方面，如何有效根治是我们需要共同努力的方向。在平时治疗的过程中，抗生素的使用也是非常普遍的，但是我们不得不面临的一个问题是耐药性的问题，因为他已经威胁到了人类自己的健康，因此，寻求抗生素以外的解决办法或许才能是我们治疗过程中的好办法。在抗生素使用方面，可以说 Frey Joachim与Steven Djordjevic也达成了共识。

　　猪以外的动物也是我们需要监测的对象

　　Frey Joachim和他的团队曾经在野牛的肺部进行剖检的过程中，检测到了肺炎支原体病原，所以这就要求我们除了猪以外，其他动物也可以作为我们监测的样本。并且在这期间，我么玩可以利用分子生物学手段，判断出支原体到底能否在空气中传播，而这个话题始终充满争议，需要我们的不断研究来论证。因为一个农场支原体的基因型大多只有一个，只有很少很少的农场存在两个肺炎支原体的基因型，环境传播方式也很少见。除此以外，分子生物学手段还可以分析出某次发病毒株是否为原始毒株等一系列的问题。

　　熊祺琰——猪支原体肺炎活疫苗佐剂研制及肌肉注射免疫效力研究

　　来自江苏省农科院的熊祺琰博士提出将猪支原体活疫苗进行肌肉注射免疫的新课题。熊博士指出：猪支原体肺炎是严重危害我国及世界养猪业发展的重要疾病。在全球，猪支原体肺炎平均感染率在70%-90%的区间内，在这中间，仅我国，每年因为此病为养猪也带来的损失高达100亿元以上。在猪支原体肺炎的防控方面，最直接有效的方式就是疫苗接种！

　　在实际免疫过程中，灭活苗免疫和活苗免疫都是现在养殖业内使用的免疫方式，但是经过实践证明——灭活苗免疫效率有限，不能完全控制疾病、不能阻止野毒在呼吸道的感染增殖、不能形成稳定、均一的免疫效力。此时，活疫苗无疑是抵抗猪支原体肺炎的最佳方式！活苗肺内免疫与其他疫苗免疫相比，具有不需佐剂辅助就直接形成良好免疫保护的优势，而肺部注射免疫法也是针对猪支原体肺炎提供保护力最直接的方式，所以它的优势是显而易见的。但是，为了满足更多更广的免疫需求，有必要开发出更加丰富的免疫方式和免疫途径，方便不同类型、不同规模的养殖场进行科学有效免疫。

　　肺内免疫可否通过其他方式实现？

　　熊博士指出，除了肺内免疫，其一些例如气雾免疫（如之前冯志新博士提到的雾化吸入免疫法，即是一种应激小、操作简便的方式）、肌肉注射、鼻腔内免疫等方式在一些疾病的免疫中我们都是见到过的，他们一样可以通过技术逐渐实现在猪支原体肺炎免疫方面的应用。上述这些免疫方式，都是比较实用的免疫方式，不同免疫方式也可达到不同的免疫效果。在除了肺内免疫之外的这些方式当中，肌肉注射免疫又是接受范围较广，最为常用的疫苗免疫方式，因此，这便成为了熊博士首先研究的方向。

　　肌内注射免疫途径研究关键——佐剂！

　　肌内注射的方式与肺内注射最大的区别就是——需要添加佐剂来进行辅助，但是不同的疫苗类型（活苗、灭活苗、亚单位疫苗等）、不同的疾病特点、接种途径（肺内、肌内、鼻腔等）、制备佐剂的方法以及最终的制造成本等方面，都会影响到佐剂的稳定性和效力。所以，怎么样使其在不影响免疫活力的情况下有效激活细胞免疫是技术难点。

　　实验、实践结论

　　熊博士也是通过一系列实验、研究，通过毒性评价、攻毒实验、安全性评价、本动物重复试验等各种方式，最终形成以佐剂成分筛选-配方设计-优选配方-确定佐剂的主要技术思路。最终经过各种毒性测定、免疫指标评价、攻毒实验及免疫应答检测，最终得出结论：

　　（1）活苗肌肉注射也可有效保护支气管纤毛，减少损伤；

　　（2）在活苗肌肉注射后，亦可形成体液免疫、细胞免疫与粘膜免疫；

　　（3）活苗配合适当佐剂肌注，可诱导产生明显的血清IgG抗体，并且一个月内都维持较高水平（与之相比，肺内免疫无法产生IgG抗体，产生的是SIgA抗体）；

　　（4）活苗肌注后诱导明显的特异性淋巴细胞增值应答。

　　Sam Holst——北美种猪场猪气喘病净化操作实施方案

　　Sam Holst首先向大家介绍了猪肺炎支原体是一种养猪业常见的病原菌，虽然其致死率不高但是可以降低猪只生产性能，他也通过一些大型养殖场的监测数据向大家阐明了自己的观点。

　　通过Sam Holst及其团队的观察发现：感染猪支原体肺炎的猪，出栏死亡率会相对健康猪只升高1%，在混合感染了蓝耳、圆环等疾病后，死亡率还会更高。同时，由于这是一种慢性消耗性疾病，它还会导致猪只饲料转化率降低，用药成本也随之升高。与前面同理，混合感染要比单纯感染情况更糟糕。单纯感染猪支原体肺炎的猪，用药成本相对其他猪只，每头会增加大约1美元的成本。随后，Sam Holst又通过对千头母猪的观察，取得了重要发现——感染猪支原体肺炎以后，每头母猪用药成本从开始到最终阶段，将会增加约100美元！高昂的用药成本，也是促使Sam Holst从事该领域研究的动力所在。

　　Sam Holst通过对北美和瑞士在猪支原体肺炎当中应用的“减群净化法”，向大家讲解了大洋彼岸的瑞士猪肺炎支原体净化方法。通过将所有小于10月龄的猪只移除，并让其停止分娩，然后通过封群的方式达到净化的目的。而在美国，这种方式被进一步改进。改进的方面即是在给药期间不停止分娩，结合长时间的封群，达到净化的目的。对于封群净化，在蓝耳病净化方面也有这方面的实践，只是支原体肺炎相对于蓝耳需要的封群时间更久，需要240天，而蓝耳病只需要210天即可。

　　在净化的过程中，空气过滤系统是一种不错的选择。即使是高密度的猪群，在空气被净化以后，也可以保持猪群的阴性率。但由于农场主大多没有进行过阳性检测，血清学检测又有一定的滞后性，因此做好后备母猪的驯化也是很重要、很漫长的过程。

　　具体实操方式：

　　第一周：引进合适数量的后备母猪，将阳性猪和阴性猪混群，让阳性母猪充分暴露，并确保所有母猪都感染，封闭240天，让他们建立自身免疫并停止排毒，240天后再进行两针免疫；

　　第二十七周：清洗猪舍、林可霉素等药物治疗；

　　第二十九周：CTC

　　全群封闭结合全群用药的方式，可以让98%的猪在一年以后保持阴性，而只用药物治疗不进行封群的对照组这个比例则只有59%。

　　Sam Holst通过简洁明了的报告，让我们了解到了国外比较实用、先进的管理理念和疾病防控策略，在报告的最后，Sam Holst指出，即使采取了这种封群的方式进行支原体的净化，对于该病的疫苗免疫还是需要进行的，这是为了做好生物安全措施，以免二次引入猪肺炎支原体病原。

　　在各位国内外专家针对猪支原体肺炎为期一天半的交流、讨论之后，本次会议也圆满的画上了句号。江苏省农科院邵国青博士作为此次会议发起人，在各位专家报告结束后，为此次论坛致闭幕词。邵博士讲到：“虽然我们的会议报告只花费一天半的时间，但是内容丰富，专注、专业、高端的特点得以体现，让各位国内外权威专家给予了大家各类理论及实践指导。从不同方面有针对性的为我们传授了丰富的经验。通过此次会议，使得国内、国际支原体防控方式有了深入交流，产生了强烈的思想碰撞，会议虽然结束，但是我们探索的脚步没有停止，交流的平台也将持久存在下去。”最后，邵博士对到场各位专家学者、养猪精英级媒体朋友表示感谢后，宣布此次论坛顺利闭幕。

　　笔者认为：通过此次论坛的举办，使得国内外猪支原体防控方面的差异得以体现，不同技术、思路得以交流，也可以让国内养猪业、养猪人更加深刻地体会到我们在疾病防控方面与国外存在的差异与差距（主要是管理理念及养殖心态方面），能够通过研讨结果，审时度势，找到适合我国当下疫病防控趋势的好方法！而在论坛中各位专家经过不断研究得出的新方法、新理念也需要我们通过实践来不断发挥其优越性，这些研讨结果和新技术新理念，或将为我国猪支原体肺炎的防控及净化作出卓越贡献。

责任编辑：刘吉霏